Perbedaan Kunci - Membran Nitroselulosa vs Nilon
Blotting adalah teknik penting untuk mendeteksi urutan tertentu DNA, RNA, dan protein dari campurannya dalam biologi molekuler. Ini dilakukan dengan menggunakan membran yang disebut blot. Ada beberapa teknik blotting yang berbeda seperti blotting utara, selatan dan barat. Memilih membran yang tepat untuk proses blotting harus dilakukan dengan hati-hati untuk mencegah pengikatan yang tidak spesifik dan deteksi yang salah. Nitroselulosa, nilon, dan PVDF adalah membran yang biasa digunakan dalam teknik blotting. Mereka memiliki karakteristik yang berbeda. Perbedaan utama antara membran nitroselulosa dan nilon adalah bahwa membran nitroselulosa memiliki potensi imobilisasi protein yang tinggi sedangkan membran nilon memiliki potensi imobilisasi asam nukleat yang tinggi. Namun, kedua jenis membran ini sering digunakan dalam teknik blotting.
DAFTAR ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Membran Nitroselulosa
3. Apa itu Membran Nilon
4. Perbandingan Berdampingan-Membran Nitroselulosa vs Nilon
5. Ringkasan
Apa itu Membran Nitroselulosa?
Membran nitroselulosa adalah filter membran yang umum digunakan dalam teknik asam nukleat dan protein blotting. Ini memiliki potensi pengikatan protein yang tinggi. Oleh karena itu, membran nitroselulosa banyak digunakan dalam teknik blotting barat. Membran nitroselulosa kompatibel dengan semua teknik hibridisasi dan menunjukkan kapasitas pengikatan yang superior tanpa gangguan. Membran nitroselulosa secara alami bersifat hidrofilik. Mereka membuat interaksi hidrofilik dengan molekul dan secara efisien melumpuhkannya ke membran. Membran nitroselulosa komersial tersedia dalam dua ukuran pori: 0,45 dan 0,2 µm.
Gambar 01: Membran nitroselulosa digunakan pada western blotting
Apa itu membran nilon?
Membran nilon adalah jenis membran komersial lain yang digunakan dalam teknik blotting. Ini secara alternatif digunakan dengan membran nitroselulosa untuk blotting selatan dan utara. Membran nilon ideal untuk blotting selatan daripada nitroselulosa karena afinitasnya yang tinggi untuk mengikat DNA. Karena beberapa fitur unik dari membran nilon, para peneliti biasanya menggunakan membran nilon untuk blotting selatan dan utara daripada di atas membran nitroselulosa. Selaput nilon juga direkomendasikan untuk pengupasan dan reprobing, tidak seperti nitroselulosa.
Gambar 02: Membran nilon digunakan untuk blotting selatan
Apa perbedaan antara Nitroselulosa dan Nilon Membran?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Membran Nitroselulosa vs Nilon |
|
| Membran nitroselulosa rapuh. | Selaput nilon kurang rapuh. |
| Penanganan | |
| Mereka sulit ditangani. | Mereka mudah ditangani. |
| Reprobing | |
| Membran nitroselulosa yang tidak didukung sulit untuk dipasang kembali. | Reprobing mudah dilakukan dengan membran nilon. |
| Kompatibilitas dengan Berbagai Kondisi Penyimpanan | |
| Membran nitroselulosa memiliki kekuatan yang lebih rendah untuk menahan berbagai kondisi penyimpanan. | Selaput nilon merespons lebih kuat terhadap berbagai kondisi penyimpanan. |
| Menggunakan | |
| Prewetting diperlukan. | Prewetting tidak diperlukan untuk membran nilon. |
| Sifat Hidrofilik | |
| Membran nitroselulosa bersifat hidrofilik tetapi kurang hidrofilik dibandingkan membran nilon. | Mereka sangat hidrofilik di alam. |
| Potensi Imobilisasi | |
| Membran nitroselulosa memiliki afinitas yang lebih rendah terhadap asam nukleat. Tetapi ia memiliki afinitas tinggi terhadap protein. | Membran nilon memiliki potensi ikatan yang tinggi dengan asam nukleat dibandingkan dengan membran nitroselulosa. |
Ringkasan - Membran Nitroselulosa vs Nilon
Membran nitroselulosa dan nilon adalah lembaran khusus yang digunakan dalam teknik blotting untuk mereproduksi pola pita pada gel. Mereka memungkinkan kemungkinan mendeteksi urutan tertentu atau protein dari campuran dengan melumpuhkannya pada membran. Setelah molekul diimobilisasi pada membran, dapat digunakan sebagai substrat untuk analisis hibridisasi dengan probe berlabel. Membran nitroselulosa umumnya digunakan untuk deteksi protein pada teknik western blotting karena afinitas pengikatannya yang tinggi dengan protein. Selaput nilon sering digunakan untuk blotting selatan dan utara. Inilah perbedaan antara membran nitroselulosa dan nilon.
