Perbedaan Kunci - HPLC vs HPTLC
Perbedaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah bahwa HPLC memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel sedangkan HPTLC tidak memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel.
Kromatografi adalah metode pemisahan fisik yang digunakan untuk memisahkan dan mengidentifikasi komponen dalam suatu campuran. Baik HPLC dan HPTLC adalah teknik kromatografi. HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi. HPTLC adalah kromatografi lapis tipis berkinerja tinggi.
ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu HPLC
3. Apa itu HPTLC
4. Perbandingan Berdampingan - HPLC vs HPTLC dalam Bentuk Tabular
5. Ringkasan
Apa itu HPLC?
HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi. Ini adalah teknik analisis yang digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan mengukur komponen dalam suatu campuran. Dalam teknik ini, sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai. Kemudian pelarut dengan sampel dilewatkan melalui pompa dengan tekanan yang diberikan. Pompa diisi dengan bahan adsorben padat. Kemudian beberapa komponen mengikat kuat ke bahan penyerap sedangkan komponen lainnya terikat secara longgar. Hal ini menyebabkan komponen memiliki laju aliran yang berbeda melalui pompa. Oleh karena itu, komponen-komponen tersebut dapat dengan mudah dipisahkan.
Gambar 01: Sistem HPLC
Bahan adsorben yang mengisi pompa dikenal sebagai fase diam. Pelarut dengan sampel terlarut dikenal sebagai fase gerak. Pompa yang digunakan dalam teknik ini disebut kolom. Kolom diisi dengan bahan adsorben, yang paling umum adalah partikel silika. Ukuran partikel ini dapat berkisar antara 2-50 μm. Proses pemisahan dipengaruhi oleh komposisi fasa gerak dan suhu sistem. Interaksi antara fase diam dan komponen dalam sampel dapat berupa interaksi hidrofobik, interaksi dipol-dipol, ikatan ionik, dll.
Tekanan operasi HPLC jauh lebih tinggi dibandingkan dengan kromatografi cair tradisional. Itu terletak di sekitar 50-350 bar. Perbedaan antara kromatografi cair dan HPLC adalah bahwa dalam kromatografi cair, sampel jatuh melalui kolom di bawah gravitasi sedangkan, dalam HPLC, sampel diberi tekanan melalui kolom. Ukuran kolom dan partikel penyerap juga sangat kecil jika dibandingkan dengan kromatografi cair tradisional. Namun, resolusi yang diberikan oleh teknik HPLC lebih unggul.
Apa itu HPTLC?
HPTLC adalah kromatografi lapis tipis berkinerja tinggi. Ini adalah bentuk TLC tradisional yang canggih dan otomatis. Teknik ini memberikan resolusi yang efisien dalam waktu singkat. Dalam metode analisis ini, sampel dan referensi dapat dianalisis secara bersamaan, yang memungkinkan sampel untuk dibandingkan dengan referensi. Ini memberikan akurasi analitik yang lebih baik daripada teknik kromatografi lainnya. Waktu yang dibutuhkan untuk analisis lebih sedikit. Teknik tersebut merupakan teknik berbiaya rendah.
Gambar 02: Analisis Pewarna Pangan dengan HPTLC
Metode HPTLC adalah proses yang sederhana, dan langkah persiapan sampel juga dihilangkan (Dalam KLT tradisional, langkah persiapan sampel dimasukkan sebelum pemisahan. Langkah ini melibatkan pembersihan dan pengayaan). Pelarut dapat digunakan secara langsung tanpa perlakuan awal apapun meskipun teknik kromatografi lainnya memerlukan perlakuan awal seperti degassing, filtrasi, dll.
Bahan adsorben yang digunakan pada HPTLC adalah silika dengan ukuran partikel yang sangat kecil. Dalam KLT tradisional, ukuran partikel silika adalah 5-20 μm sedangkan pada HPTLC, adalah 4-8 μm. Sampel diaplikasikan pada pelat HPTLC menggunakan aplikator. Ini memberikan aplikasi yang seragam dan aman. Kemudian pelat ditempatkan di ruang yang memiliki fase gerak. Ruang harus jenuh dengan uap fase gerak. Setelah proses HPTLC, bintik-bintik yang telah berpindah dapat dideteksi. Saat mendeteksi bintik-bintik di piring, teknik HPTLC menggunakan daerah UV atau ruang yodium yang sesuai.
Apa Perbedaan Antara HPLC dan HPTLC?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi. | HPTLC adalah kromatografi lapis tipis berkinerja tinggi. |
| Teknik | |
| Dalam HPLC, fasa gerak dengan pelarut dilewatkan melalui kolom yang diisi dengan fasa diam. | Dalam HPTLC, sampel terlihat pada pelat KLT dan ditempatkan di dalam ruang yang berisi fase gerak; kemudian sampel dibiarkan bermigrasi ke atas pelat bersama dengan fase gerak. |
| Pengukuran | |
| Dalam HPLC, perbedaan laju aliran komponen melalui kolom digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. | Pada HPTLC, perbedaan jarak yang ditempuh oleh setiap komponen dalam sampel digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. |
| Pemisahan Kuantitatif | |
| HPLC memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel. | HPTLC tidak memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel. |
Ringkasan - HPLC vs HPTLC
HPLC dan HPTLC adalah dua teknik kromatografi. Perbedaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah bahwa HPLC memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel sedangkan HPTLC tidak memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel.
