Perbedaan Utama - Phusion vs Taq Polymerase
DNA polimerase adalah enzim yang banyak digunakan dalam teknik biologi molekuler dan juga secara alami ada di semua organisme yang mengalami replikasi DNA. Mereka adalah enzim polimerisasi kunci yang terlibat selama replikasi. DNA polimerase mampu menambahkan nukleotida ke ujung 3 'bebas untai DNA sehingga menyebabkan ekstensi untai baru. Saat ini, karena perkembangan biologi molekuler dalam diagnosa penyakit dan aplikasi industri, penting untuk membuat polimerase yang memiliki berbagai sifat yang bermanfaat. Ini meningkatkan akurasi metode dan menjadikannya teknik yang lebih cepat. Phusion dan Taq polymerase adalah dua enzim polimerase termostabil yang diproduksi secara komersial yang digunakan dalam aplikasi molekuler khusus. Fusi adalah DNA polimerase yang diisolasi dari Pyrococcus furiosus dan terutama digunakan dalam eksperimen kloning untuk meningkatkan ketepatan. Taq DNA Polymerase adalah DNA polimerase standar yang digunakan dalam Polymerase Chain Reaction (PCR), dan diisolasi dari bakteri termostabil; Thermus aquaticus. Perbedaan utama antara kedua enzim ini adalah mikroorganisme sumber. Fusi diisolasi dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus sedangkan, polimerase Taq diisolasi dari termofil, Thermus aquaticus. Taq polimerase diisolasi dari termofil, Thermus aquaticus. Taq polimerase diisolasi dari termofil, Thermus aquaticus.
ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Fusi
3. Apa itu Taq Polimerase
4. Persamaan Antara Fusi dan Polimerase Taq
5. Perbandingan Berdampingan - Fusi vs Polimerase Taq dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Phusion?
Polimerase DNA fusi adalah polimerase baru yang diproduksi dengan mengisolasi enzim dari Pyrococcus furiosus, yang merupakan Archaea ekstremofilik. Mikroba ini berada dalam kondisi suhu yang sangat tinggi, sehingga membuat polimerase menjadi polimerase yang sangat stabil terhadap panas. Polimerase fusi digunakan untuk mendapatkan kesetiaan yang ekstrim pada polimerase termostabil konvensional; Taq polimerase. Polimerase fusi mampu memperkuat templat panjang hingga 7,5kb DNA genom. Kapasitas polimerisasi fusi polimerase yang optimal adalah pada 72 0 C. Fusi juga digunakan dalam produk kloning untuk sekuensing, analisis ekspresi dan analisis mutasi.
Phusion DNA polymerase memiliki aktivitas eksonuklease 3 '- 5'. Hal ini memungkinkan pengoreksian untai yang baru disintesis setelah sintesis. Oleh karena itu, ketidakcocokan nukleotida mudah diperbaiki. Jadi, ia memiliki tingkat kesalahan yang lebih rendah. Keuntungan keseluruhan dari polimerase fusi adalah;
- Kesetiaan Ekstrim
- Kecepatan Tinggi dan pengurangan waktu perpanjangan
- Reaksi Kuat dan membutuhkan pengoptimalan minimal
- Hasil Tinggi
Gambar 01: Phusion
Kerugian utama dari Phusion polymerase adalah ia dihambat dengan adanya deoxyuridine triphosphate (dUTP). Ketika dUTP terakumulasi dalam campuran reaksi, hal itu dapat menghambat kerja polimerase fusi. Ini dicegah dengan memperlakukan campuran reaksi dengan dUTPase sebelum menambahkan enzim. Saat ini, varian tahan dUTP dari Phusion polymerase yang dikenal sebagai Pfu Turbo digunakan sebagai pengganti Phusion polymerase sebagai solusi untuk masalah ini.
Apa itu Taq Polymerase?
Penemuan DNA polimerase Taq telah merevolusi bidang biologi molekuler. Ini memecahkan masalah besar dalam amplifikasi DNA. Taq DNA polymerase adalah enzim polimerase stabil panas yang diekstraksi dan diisolasi dari bakteri termofilik, Thermus aquaticus. Penemuan enzim ini mengarah pada pengembangan PCR. Enzim ini telah memungkinkan penggunaan reaksi berantai polimerase dalam amplifikasi DNA daripada teknik kloning konvensional yang melelahkan. PCR sekarang digunakan dalam bidang diagnostik molekuler, pertanian dan industri dengan banyak variasi baru yang ditambahkan ke dalam teknik ini.
Gambar 02: Taq Polymerase
DNA polimerase Taq berfungsi pada rentang temperatur optimal antara 72 0 C - 80 0 C. DNA polimerase Taq membutuhkan co-factor; magnesium untuk fungsinya. Taq polimerase tidak memiliki kemampuan proofreading 3 '- 5', oleh karena itu, tingkat kesalahan Taq DNA polimerase tinggi dibandingkan dengan jenis DNA polimerase yang lebih baru seperti Phusion polymerase dll. Namun, popularitas Taq DNA polimerase tetap sama di seluruh dunia sains karena kenyamanan dan fleksibilitas enzim.
Apa Persamaan Antara Phusion dan Taq polymerase?
- Enzim Phusion dan Taq polimerase adalah enzim polimerisasi yang mampu menambahkan nukleotida ke ujung bebas 3 'untai DNA.
- Polimerase Phusion dan Taq membutuhkan urutan primer untuk memulai polimerisasi.
- Baik Phusion dan Taq polimerase stabil terhadap panas.
- Baik Phusion dan Taq polimerase digunakan dalam mekanisme PCR untuk memperkuat DNA.
- Saat menambahkan polimerase ke campuran reaksi, baik polimerase Phusion dan Taq ditambahkan terakhir untuk memastikan efisiensi enzim.
- Baik Phusion dan Taq polimerase disintesis secara komersial untuk tujuan percobaan biologi molekuler.
- Baik polimerase Phusion dan Taq membutuhkan kofaktor untuk menyelesaikan fungsinya.
Apa Perbedaan Antara Phusion dan Taq Polymerase?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Phusion vs Taq Polymerase |
|
| Fusi adalah polimerase DNA yang diisolasi dari Pyrococcus furiosus dan terutama digunakan dalam eksperimen kloning untuk meningkatkan kesetiaan. | Taq DNA Polymerase adalah DNA polimerase standar yang digunakan dalam Polymerase Chain Reaction (PCR), dan diisolasi dari bakteri termostabil, Thermus aquaticus. |
| Organisme Sumber | |
| Fusi diekstraksi dari arkea ekstremofilik - Pyrococcus furiosus. | Karya sastra ini terbentang dari periode penjajahan hingga periode dekolonisasi. |
| Kemampuan Membaca Bukti | |
| Kemampuan membaca bukti 3 '- 5' hadir di Phusion. | Kemampuan membaca bukti 3 '- 5' tidak ada dalam Taq polimerase. |
| Kesetiaan | |
| Kesetiaan tinggi ada di sana dengan Phusion. | Taq polimerase menunjukkan kesetiaan yang rendah. |
| Amplifikasi | |
| Fusi mampu memperkuat fragmen DNA yang panjang. | Taq polimerase mampu memperkuat fragmen DNA yang jauh lebih pendek. |
| Keracunan dUTP | |
| Tindakan fusi dihambat oleh akumulasi ganjil. | Taq polimerase tidak dihambat oleh dUPT. |
Ringkasan - Phusion vs Taq polymerase
Phusion dan Taq DNA polymerase adalah dua polimerase stabil panas yang digunakan dalam teknik PCR. Fusi adalah polimerase yang diisolasi dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus sedangkan, Taq diisolasi dari bakteri termostabil Thermus aquaticus. Penemuan DNA polimerase Taq mengarah pada penemuan PCR. Phusion memiliki banyak keunggulan dibandingkan Taq yang membuat Phusion menjadi pilihan yang lebih baik dalam menghasilkan DNA dengan ketelitian tinggi. Namun, Taq polimerase masih digunakan sebagai enzim polimerase standar di PCR. Inilah perbedaan antara Phusion dan Taq polimerase.
