Perbedaan Kunci - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia
Diagnosis penyakit, yang menggunakan metode biologi molekuler, telah menjadi bidang baru dalam teknologi laboratorium klinis. Ini mencakup semua tes dan metode untuk mengidentifikasi penyakit dan memahami penyebab penyakit dengan menganalisis DNA, RNA atau protein yang diekspresikan dalam suatu organisme. Kemajuan pesat dalam diagnostik molekuler telah memungkinkan penelitian dasar tentang penyakit menular dan tidak menular. Ini digunakan untuk menentukan perubahan dalam urutan atau tingkat ekspresi pada gen atau protein penting yang terlibat dalam penyakit. Immunofluorescence (IF) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang banyak digunakan dalam biologi kanker. IF adalah jenis IHC dimana metode deteksi fluoresensi digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, sedangkan IHC menggunakan metode berbasis kimia untuk mendeteksi antibodi monoklonal dan poliklonal. Inilah perbedaan utama antara IF dan IHC.
ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Imunofluoresensi
3. Apa itu Imunohistokimia
4. Persamaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia
5. Perbandingan Berdampingan - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Immunofluorescence (IF)?
Imunofluoresensi adalah teknik deteksi di mana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan pewarna fluoresen atau protein fluoresen untuk tujuan deteksi. Antibodi sekunder berlabel dapat menghasilkan sinyal latar belakang yang tidak diinginkan; Oleh karena itu, teknik IF didasarkan pada pelabelan antibodi primer itu sendiri saat ini untuk menghindari sinyal yang tidak diinginkan selama deteksi. Melalui teknik ini, ikatan non-spesifik antara antibodi primer dan sekunder dicegah, dan ini lebih cepat karena tidak ada langkah inkubasi sekunder yang terlibat. Kualitas data juga ditingkatkan.
Gambar 01: Pewarnaan imunofluoresensi ganda untuk BrdU, NeuN, dan GFAP
Fluorokrom atau pewarna fluoresen adalah senyawa yang dapat menyerap radiasi, lebih disukai radiasi ultra violet yang tereksitasi. Ketika partikel mencapai keadaan dasar dari keadaan tereksitasi, mereka memancarkan radiasi yang ditangkap dan dideteksi oleh detektor untuk membentuk spektrum. Sangat penting bahwa label fluoresen kompatibel dan stabil untuk reaksi tertentu dan harus dikonjugasikan dengan benar ke antibodi untuk mendapatkan hasil yang akurat. Salah satu fluorokrom yang paling banyak digunakan adalah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan panjang gelombang puncak serapan dan emisi masing-masing 490 nm dan 520 nm. Rhodamin, agen lain yang digunakan dalam IF, berwarna merah dan memiliki panjang gelombang puncak penyerapan dan emisi yang berbeda yaitu 553 nm dan 627 nm.
Apa itu Imunohistokimia (IHC)?
IHC adalah metode pengujian molekuler yang dilakukan untuk mengidentifikasi dan mengkonfirmasi keberadaan antigen di sel target. Sel target bisa berupa partikel infeksius, mikroba patogen, atau sel tumor ganas. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan keberadaan antigen yang ada di permukaan sel sel target. Teknik ini didasarkan pada pengikatan antigen-antibodi. Sebuah penanda deteksi dikonjugasikan dengan antibodi ini untuk mendeteksi ada atau tidaknya antigen tertentu. Penanda ini dapat berupa penanda kimiawi seperti enzim, antibodi dengan penanda fluoresen, atau antibodi berlabel radio.
Gambar 02: Irisan otak tikus yang diwarnai oleh Imunohistokimia
Aplikasi IHC yang paling populer adalah biologi sel kanker untuk mengidentifikasi keberadaan tumor ganas, tetapi juga digunakan untuk mendeteksi penyakit menular.
Apa Persamaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry?
- Imunofluoresensi dan Imunohistokimia berlangsung dalam kondisi in vitro.
- Kedua teknik tersebut didasarkan pada antigen-antibodi
- Keduanya merupakan teknik yang sangat cepat.
- Hasil dari teknik dapat direproduksi.
- Keduanya telah meningkatkan kualitas data.
- Teknik ini digunakan dalam diagnosa untuk kanker dan penyakit menular.
Apa Perbedaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Imunofluoresensi vs Imunohistokimia |
|
| IF adalah teknik deteksi di mana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan pewarna fluoresen atau protein fluoresen untuk pendeteksian. | IHC adalah teknik deteksi di mana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan bahan kimia atau elemen radioaktif untuk deteksi. |
| Ketepatan | |
| Akurasi lebih tinggi dalam teknik IF dibandingkan dengan IHC. | Akurasi lebih rendah di IHC. |
| Kekhususan | |
| JIKA lebih spesifik. | IHC kurang spesifik. |
Ringkasan - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia
Mekanisme molekuler telah membawa banyak perubahan di bidang kedokteran, sehingga memunculkan metode pengujian molekuler tingkat lanjut yang telah menghasilkan revolusi di bidang diagnostik. Penemuan ini telah menghasilkan identifikasi dan konfirmasi penyakit yang cepat dan akurat, dengan demikian memungkinkan administrasi dan produksi obat yang berhasil. Teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk menemukan target obat dan untuk memastikan sifat farmakokinetik obat selama metabolisme obat. IF dan IHC adalah dua metode diagnostik yang didasarkan pada konsep pengikatan antigen dan antibodi, meskipun cara deteksi pada kedua teknik tersebut berbeda. IF menggunakan prinsip fluoresensi untuk mendeteksi antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mendeteksi antigen. Inilah perbedaan antara IF dan IHC.
Unduh Versi PDF Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silahkan download versi PDF disini Perbedaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry.
