Perbedaan Kunci - Gram Stain vs Acid Fast
Bakteri adalah mikroorganisme yang sangat kecil. Mereka transparan, dan pendeteksiannya sulit dalam kondisi hidup dan tidak ternoda. Dengan demikian, berbagai metode pewarnaan dikembangkan untuk memfasilitasi deteksi bakteri. Ada tiga jenis utama teknik pewarnaan: pewarnaan sederhana, pewarnaan diferensial, dan pewarnaan struktural. Pewarnaan diferensial adalah teknik yang menggunakan lebih dari satu pewarnaan untuk membedakan bakteri. Pewarnaan Gram dan pewarnaan tahan asam paling populer disebut pewarnaan diferensial. Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial, yang memisahkan bakteri menjadi dua kelompok yang dikenal sebagai bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif. Pewarnaan tahan asam adalah pewarnaan diferensial yang digunakan untuk mengidentifikasi organisme tahan asam seperti Mycobacterium dari organisme tahan asam. Inilah perbedaan utama antara pewarnaan Gram dan pewarnaan Cepat Asam.
ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Pewarnaan Gram
3. Apa itu Cepat Asam
4. Persamaan Antara Pewarnaan Gram dan Cepat Asam
5. Perbandingan Berdampingan - Pewarnaan Gram vs Cepat Asam dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Gram Stain?
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial penting yang digunakan untuk identifikasi bakteri dalam mikrobiologi. Teknik ini diperkenalkan oleh ahli bakteri Denmark Hans Christian Gram pada tahun 1884. Pewarnaan Gram mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok besar yaitu gram positif dan gram negatif, yang sangat penting dalam klasifikasi dan identifikasi bakteri. Ahli mikrobiologi melakukan pewarnaan gram sebagai langkah awal dalam karakterisasi bakteri selama penelitian mereka.
Bakteri dikelompokkan berdasarkan perbedaan dinding selnya. Bakteri gram positif terdiri dari lapisan peptidoglikan yang tebal di dinding selnya sedangkan bakteri gram negatif terdiri dari lapisan peptidoglikan tipis di dinding selnya. Hasil pewarnaan gram akan didasarkan pada perbedaan ketebalan lapisan peptidoglikan dinding sel.
Pewarnaan gram dilakukan dengan menggunakan empat reagen berbeda yaitu; noda primer, mordan, agen penghilang warna dan noda counter. Crystal violet dan safranin digunakan sebagai pewarna primer dan penghilang noda, sedangkan gram yodium dan alkohol 95% masing-masing digunakan sebagai mordan dan penghilang warna. Langkah-langkah dasar pewarnaan gram adalah sebagai berikut;
- Apusan bakteri disiapkan pada slide kaca bersih, panas diperbaiki dan didinginkan.
- Smear dibanjiri kristal violet selama 1 - 2 menit.
- Noda dibilas dengan air keran yang mengalir lambat untuk menghilangkan noda berlebih.
- Gram yodium dioleskan ke smear selama 1 menit.
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir lambat
- Smear dicuci dengan alkohol 95% selama 2 - 5 detik dan dibilas dengan air keran yang mengalir lambat.
- Smear diwarnai dengan safranin selama 1 menit
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir lambat, dikeringkan dan diamati di bawah mikroskop.
Pada akhir pewarnaan gram akan diamati bakteri gram negatif berwarna merah jambu sedangkan bakteri gram positif akan diamati berwarna ungu.
Gambar 01: Bakteri Gram negatif dan Gram positif
Hasil pewarnaan gram ditentukan oleh ketebalan lapisan peptidoglikan di dinding selnya. Selama tahap penghilangan warna, noda primer dan mordan mudah dihilangkan dari bakteri gram negatif dan menjadi tidak berwarna karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis. Pewarnaan primer dipertahankan pada bakteri gram positif karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal. Pewarnaan counter tidak akan efektif untuk bakteri gram positif karena retensi noda primer. Dengan demikian, gram bakteri positif akan terlihat dalam warna noda primer yaitu warna ungu. Counter stain akan menodai bakteri gram negatif, dan akan terlihat pada warna pilihan, yaitu warna safranin. Oleh karena itu, mudah untuk mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok berdasarkan pewarnaan gram dan hal ini sangat berguna dalam diferensiasi dan identifikasi bakteri.
Apa itu Fast Acid?
Tahan asam adalah sifat fisik bakteri tertentu, khususnya ketahanannya terhadap dekolorisasi oleh asam selama prosedur pewarnaan. Setelah diwarnai, organisme ini menolak prosedur penghilangan warna berbasis asam dan atau etanol yang umum di banyak protokol pewarnaan. Jadi, nama 'tahan asam' diberikan kepada organisme tersebut. Sifat ini ditunjukkan karena memiliki bahan lilin (asam mikolat) tingkat tinggi di dinding selnya. Tes ini sangat penting untuk identifikasi Mycobacterium tuberculosis.
Gambar 2: Mikobakteri Cepat Asam
Pewarnaan tahan asam ini dikembangkan oleh Paul Ehrlich pada tahun 1882. Teknik tahan asam Ehrlich dimodifikasi oleh Ziehl-Neelsen dan sekarang lebih sering digunakan. Prosedur pewarnaan cepat asam melibatkan tiga reagen berbeda. Carbol fuschin digunakan sebagai pewarna primer. Alkohol asam digunakan sebagai agen penghilang warna. Methylene Blue digunakan sebagai counter stain. Prosedur pewarnaan dilakukan sebagai berikut.
- Pewarnaan primer (carbol fuchsin) diaplikasikan pada spesimen tetap pada slide (Semua sel akan diwarnai dengan warna merah).
- Slide dipanaskan dengan mengukus selama 5 menit, yang mendorong noda ke dalam sel dengan benar.
- Kemudian larutan dekolorisasi ditambahkan (Ini menghilangkan pewarna merah dari semua sel kecuali bakteri tahan asam).
- Methylene blue ditambahkan sebagai counter stain (Ini mewarnai semua sel bakteri yang tidak berwarna).
- Bakteri tahan asam tetap berwarna merah sementara bakteri cepat non-asam bernoda biru.
Apa Persamaan Antara Gram Stain dan Fast Asam?
- Pewarnaan Gram dan Asam cepat adalah dua teknik pewarnaan diferensial.
- Kedua teknik tersebut mengelompokkan bakteri menjadi dua kelompok.
- Kedua teknik tersebut menggunakan dua noda dan satu penghilang warna.
Apa Perbedaan Antara Gram Stain dan Fast Asam?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Pewarnaan Gram vs Cepat Asam |
|
| Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial, yang memisahkan bakteri menjadi dua kelompok bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif. | Pewarnaan Cepat Asam adalah pewarnaan diferensial yang digunakan untuk mengidentifikasi organisme tahan asam dari organisme tahan asam. |
| Pewarnaan Primer | |
| Crystal violet adalah pewarnaan primer yang umum digunakan dalam pewarnaan gram. | Karbol fuchsin adalah pewarnaan utama yang digunakan dalam fast acid fast. |
| Agen Penghilang Warna | |
| 95% alkohol digunakan sebagai agen penghilang warna dalam pewarnaan gram. | Alkohol asam digunakan sebagai agen penghilang warna dalam puasa asam. |
| Counter Stain | |
| Pewarnaan Gram menggunakan safranin sebagai counter stain. | Pewarnaan tahan asam menggunakan biru metilen sebagai counter stain. |
| Pengamatan | |
| Bakteri gram negatif diamati dalam warna pilihan dan gram bakteri positif diamati dalam warna ungu. | Bakteri tahan asam diamati dalam warna merah dan bakteri tahan asam diamati dalam warna biru. |
Ringkasan - Pewarnaan Gram vs Cepat Asam
Visualisasi mikroorganisme dalam keadaan hidup itu sulit. Oleh karena itu, pewarnaan biologis dan prosedur pewarnaan digunakan secara ekstensif untuk mempelajari sifat-sifatnya. Pewarnaan diferensial adalah salah satu jenis teknik pewarnaan yang digunakan untuk membedakan bakteri. Pewarnaan Gram dan pewarnaan tahan asam adalah dua teknik pewarnaan diferensial. Pewarnaan Gram membedakan bakteri gram negatif dan bakteri gram positif berdasarkan ketebalan dinding selnya. Pewarnaan tahan asam membedakan bakteri tahan asam dari bakteri tahan asam berdasarkan kandungan asam mikolat di dinding sel. Inilah perbedaan antara tahan asam dan pewarnaan gram.
Unduh Versi PDF Gram Stain vs Acid Fast
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silahkan download versi PDF disini Perbedaan Antara Gram Stain dan Acid Fast.
