Perbedaan Utama - Transfeksi Transien vs Stabil
Transfeksi adalah proses yang terlibat dalam transfer gen sel eukariotik menggunakan metode kimia atau fisik. Transfeksi dapat diklasifikasikan menjadi dua jenis utama yang disebut transfeksi transien dan transfeksi stabil. Selama transfeksi transien, gen yang diinginkan gagal berintegrasi dengan genom inang dan diekspresikan secara temporer di dalam inang untuk jangka pendek sedangkan, dalam transfeksi yang stabil, gen yang diinginkan terintegrasi dengan genom inang dan dipertahankan untuk jangka panjang dalam beberapa generasi.. Inilah perbedaan utama antara transfeksi transien dan stabil. Dalam kedua kasus tersebut, transfeksi berhasil, dan gen diekspresikan.
DAFTAR ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Transfeksi Transien
3. Apa itu Transfeksi Stabil
4. Perbandingan Berdampingan - Transfeksi Transien vs Stabil
5. Ringkasan
Apa itu Transfeksi Transien?
Transfeksi merupakan alat penting untuk memasukkan gen ke dalam sel eukariotik. Di antara dua jenis transfeksi, transfeksi transien adalah cara yang umum dalam transfer gen. Melalui vektor, gen asing diubah di dalam sel inang. Begitu DNA asing memasuki sel inang, ia memiliki dua opsi. Ia dapat berintegrasi dengan genom inang dan bereplikasi, atau tetap di dalam tanpa berintegrasi ke dalam genom. Transfeksi transien menunjukkan ekspresi sementara dari gen yang disisipkan tanpa berintegrasi ke dalam genom inang. Gen mengekspresikan dan menghasilkan protein berkode sampai sel membelah. Namun, karena ketidakmampuan integrasi, ia tidak dapat mereplikasi dan masuk ke generasi mendatang. Transfeksi jenis ini berhasil dalam waktu singkat. Selama pembelahan sel atau karena beberapa faktor lain, DNA asing mengalami degradasi. Transfeksi transien ditunjukkan ketika DNA asing dalam bentuk DNA yang sangat melingkar.
Gambar 01: Transfeksi Transien
Apakah Transfeksi Stabil itu?
Transfeksi yang stabil menunjukkan integrasi gen asing yang berhasil ke dalam genom inang. Setelah DNA asing masuk ke dalam sel inang, bagian dari DNA asing berintegrasi dengan genom inang dan menjadi bagian darinya. Karenanya, DNA asing juga bereplikasi dan diturunkan ke generasi mendatang ketika genom inang bereplikasi. Jenis transfeksi ini rumit dan jarang. Namun, karena transfeksi yang stabil ke dalam genom, sifat ini dipertahankan untuk jangka waktu beberapa generasi yang lebih lama.
Transfeksi yang stabil adalah proses yang sulit dan membutuhkan pengiriman DNA yang efektif dan akuisisi sel dari DNA asing ke dalam genomnya. Oleh karena itu, DNA linier lebih menyukai transfeksi yang stabil daripada DNA sirkuler. Namun, tingkat transfeksi yang stabil kira-kira satu dari 10 4 sel yang ditransformasikan. Transfeksi yang stabil dapat diamati dengan kotransfomasi penanda yang dapat dipilih dan melakukan seleksi buatan pada media.
Gambar 02: Transfeksi Stabil
Apa perbedaan antara Transfeksi Transien dan Stabil?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Transfeksi Transien vs Stabil |
|
| DNA asing tidak berintegrasi ke dalam genom inang. | DNA asing terintegrasi dengan genom inang dan menjadi bagian darinya. |
| Replikasi dalam Host | |
| Gen yang ditransfeksi secara transien tidak mereplikasi di dalam inang. Oleh karena itu, gen tidak diturunkan ke generasi berikutnya. | Gen direplikasi di dalam inang dan diteruskan ke generasi mendatang. |
| Durasi waktu Ekspresi Gen | |
| Gen diekspresikan untuk jangka waktu terbatas dan setelah itu, mereka dihancurkan. | Gen menjadi bagian dari genom dan diekspresikan dalam generasi untuk jangka waktu yang lama. |
| Menggunakan | |
| Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi jangka pendek gen atau produk gen. | Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi gen dalam jangka panjang. |
| Deteksi Transfeksi | |
| Gen diekspresikan dan dapat dengan mudah dideteksi dengan memasukkan gen reporter. | Transfeksi yang stabil dapat dengan mudah dideteksi dengan memasukkan penanda yang dapat dipilih dan memilih melalui seleksi buatan pada media. |
| Kejadian dan Proses | |
| Transfeksi transien sering terjadi dan tidak rumit untuk dilakukan. | Transfeksi yang stabil jarang terjadi dan rumit untuk dilakukan. |
| Sifat DNA | |
| DNA yang sangat superkoil cocok untuk transfeksi transien. | DNA linier cocok untuk transfeksi yang stabil. |
| Aplikasi | |
| Ini digunakan untuk studi knockdown gen atau pembungkaman dengan RNA penghambat, produksi protein dalam skala kecil | Ini digunakan untuk produksi protein dalam skala besar, studi farmakologi jangka panjang, terapi gen, penelitian tentang mekanisme regulasi genetik jangka panjang |
Ringkasan - Transfeksi Transien vs Stabil
Transeksi transien dan stabil adalah dua jenis transeksi yang ditunjukkan selama transfer gen ke sel eukariotik oleh sistem berbasis non-virus. DNA asing yang ditransformasikan tidak terintegrasi dengan genom inang dalam transfeksi transien sementara DNA berintegrasi dengan genom inang dalam transfeksi stabil. DNA melingkar melingkar diperlihatkan transfeksi transien sedangkan DNA linier lebih menyukai transfeksi yang stabil. Inilah perbedaan antara transfeksi transien dan stabil. Namun transfeksi transien lebih umum dan mudah dibandingkan dengan transfeksi stabil. Tetapi pemilihan salah satu di antara dua tergantung pada tujuan transfer gen dan durasi proyek penelitian.
