Perbedaan Kunci - Pewarnaan Gram vs Kultur
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan yang dilakukan untuk membedakan bakteri menjadi dua kelompok sesuai dengan ketebalan lapisan peptidoglikan di dinding selnya. Kultur adalah metode menumbuhkan dan memelihara mikroorganisme dalam kondisi laboratorium untuk analisis yang berbeda. Perbedaan utama antara pewarnaan gram dan kultur adalah fungsinya; gram strain merupakan teknik pewarnaan bakteri dimana kultur adalah metode menumbuhkan dan memelihara mikroorganisme.
DAFTAR ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Pewarnaan Gram
3. Apa itu Kultur
4. Perbandingan Berdampingan - Pewarnaan Gram vs Kultur
5. Ringkasan
Apa itu Gram Stain?
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial penting yang digunakan untuk identifikasi bakteri dalam Mikrobiologi. Teknik ini diperkenalkan oleh ahli bakteri Denmark Hans Christian Gram pada tahun 1884. Pewarnaan Gram mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok besar: gram positif dan gram negatif; ini sangat penting dalam klasifikasi dan identifikasi bakteri. Pewarnaan Gram dilakukan sebagai langkah awal untuk karakterisasi bakteri.
Bakteri dikelompokkan berdasarkan perbedaan dinding selnya. Bakteri gram positif mengandung lapisan peptidoglikan yang tebal pada dinding selnya sedangkan bakteri gram negatif mengandung lapisan peptidoglikan tipis pada dinding selnya seperti pada gambar 01. Hasil pewarnaan gram akan didasarkan pada perbedaan ketebalan lapisan peptidoglikan dinding sel.
Gambar 1: Bakteri gram positif dan bakteri gram negatif
Pewarnaan gram dilakukan dengan menggunakan empat reagen berbeda yaitu; noda primer, mordan, agen penghilang warna dan noda counter. Crystal violet dan safranin masing-masing berfungsi sebagai pewarna primer dan counter, sedangkan gram yodium dan alkohol 95% masing-masing berfungsi sebagai mordan dan penghilang warna.
Langkah Dasar Pewarnaan Gram
- Apusan bakteri disiapkan pada slide kaca bersih, panas diperbaiki dan didinginkan.
- Smear dibanjiri kristal violet selama 1 - 2 menit.
- Noda dibilas dengan air keran yang mengalir lambat untuk menghilangkan noda berlebih.
- Gram yodium dioleskan ke smear selama 1 menit.
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir lambat
- Smear dicuci dengan alkohol 95% selama 2 - 5 detik dan dibilas dengan air keran yang mengalir lambat.
- Smear diwarnai dengan safranin selama 1 menit
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir lambat, dikeringkan dan diamati di bawah mikroskop.
Pada akhir pewarnaan gram akan terlihat bakteri gram negatif berwarna merah jambu sedangkan bakteri gram positif diamati dengan warna ungu seperti pada Gambar 02. Hasil pewarnaan gram ditentukan oleh ketebalan lapisan peptidoglikan di dinding sel mereka. Selama tahap penghilangan warna, noda primer dan mordan mudah dihilangkan dari bakteri gram negatif dan menjadi tidak berwarna karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis. Pewarnaan primer dipertahankan dalam gram bakteri positif karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal. Penghilang noda tidak akan efektif untuk gram bakteri positif karena retensi noda utama. Jadi gram bakteri positif akan terlihat dengan warna noda primer, yaitu warna ungu. Counter stain akan menodai bakteri gram negatif dan akan terlihat pada warna pilihan yaitu warna safranin. Oleh karena itu, mudah untuk mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok berdasarkan pewarnaan gram dan hal ini berguna dalam diferensiasi dan identifikasi bakteri.
Gambar 2: Gram Strain
Apa itu Budaya?
Kultur mikroba adalah metode pembiakan dan pemeliharaan mikroorganisme dalam kondisi laboratorium untuk tujuan yang berbeda. Budidaya ditanam pada media padat, semi padat dan cair sesuai dengan jenis dan tujuan pembudidayaan mikroorganisme. Kultur diberikan nutrisi yang diperlukan dan kondisi pertumbuhan yang dibutuhkan oleh mikroorganisme. Ada berbagai komponen media kultur seperti sumber energi, sumber karbon, sumber nitrogen, mineral, mikronutrien, air, zat penguat, dll. Suhu optimal, oksigen dan pH harus disesuaikan dengan jenis mikroorganisme yang ditanam.
Ada berbagai jenis kultur mikroba; misalnya kultur batch, kultur kontinyu, kultur tusuk, kultur agar plate, kultur kaldu, dll. Menurut komposisi media tanam, terdapat berbagai jenis media kultur yang dikenal sebagai media sintetik, media semi sintetik dan media alami. Kultur mikroba disiapkan dalam kondisi steril di dalam ruang khusus yang disebut aliran udara laminar. Media tanam dan peralatan gelas disterilkan sebelum inokulasi mikroorganisme yang diinginkan. Dalam kondisi steril yang tepat, mikroorganisme target dipindahkan ke media nutrisi yang disterilkan dan diinkubasi pada suhu optimal. Di dalam medium tersebut, mikroorganisme akan tumbuh dan berkembang biak dengan menggunakan unsur hara yang diberikan.
Gambar 3: Kultur bakteri di atas piring
Apa perbedaan antara Gram Stain dan Kultur?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Pewarnaan Gram vs Kultur |
|
| Strain gram adalah teknik pewarnaan diferensial yang digunakan untuk diferensiasi dan identifikasi bakteri. | Kultur mikroba adalah salah satu metode menumbuhkan mikroorganisme di laboratorium. |
| Komponen | |
| Ini menggunakan reagen berbeda termasuk dua noda. | Ini menggunakan media kultur yang berbeda seperti media padat, semi padat dan cair yang terdiri dari nutrisi dan kondisi lain yang diperlukan. |
| Fungsi dasar | |
| Ini memungkinkan pengelompokan bakteri menjadi dua kelompok: gram negatif dan gram positif. | Ini memungkinkan perbanyakan mikroorganisme untuk tujuan yang berbeda. |
| Mendasarkan | |
| Hasil pewarnaan Gram didasarkan pada perbedaan lapisan peptidoglikan dinding sel. | Mikroorganisme akan tumbuh dan berkembang biak di dalam media kultur. |
| Hasil | |
| Bakteri negatif gram tampak dalam warna merah jambu dan gram bakteri positif berwarna ungu. | Di piring, koloni mikroorganisme dapat dilihat. Pada media cair, mikroorganisme berbentuk tersuspensi. |
Ringkasan - Pewarnaan Gram vs Kultur
Kultur mikroba disiapkan dan dipelihara dalam kondisi laboratorium untuk tujuan yang berbeda seperti penyimpanan, pengujian, pemurnian kimia, dll. Pewarnaan gram adalah prosedur pewarnaan yang membedakan bakteri menjadi dua kelompok utama yang disebut gram bakteri negatif dan gram bakteri positif. Oleh karena itu, perbedaan antara pewarnaan gram dan kultur adalah pewarnaan gram adalah teknik pewarnaan bakteri sedangkan kultur adalah metode menumbuhkan dan memelihara mikroorganisme di laboratorium.
