Perbedaan Kunci - Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel
Elektroforesis adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan biomolekul berdasarkan muatan partikel, ukuran partikel, dan bentuk partikel. Migrasi molekul, yang dikenal sebagai mobilitas elektroforetik, bergantung pada jenis polimer / gel yang digunakan, ukuran pori-porinya, tegangan yang diberikan, waktu berjalan, dan rasio permukaan terhadap volume. Ada berbagai jenis teknik elektroforesis berdasarkan jenis biomolekul yang digunakan. Jenis elektroforesis yang pertama kali ditemukan adalah elektroforesis kertas dimana kertas nitroselulosa digunakan sebagai media untuk pemisahan biomolekul. Prinsip elektroforesis gel di mana gel berukuran pori berbeda digunakan untuk memisahkan biomolekul, kemudian ditemukan. Teknik elektroforesis gel kemudian dimodifikasi untuk meningkatkan akurasi teknik, dan salah satu modifikasinya adalah elektroforesis kapiler. Perbedaan utama antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel adalah bahwa elektroforesis gel dilakukan dalam bidang vertikal atau horizontal menggunakan gel polimer dengan ukuran pori standar sedangkan elektroforesis kapiler dilakukan dalam tabung kapiler dengan cairan polimer atau gel.
ISI
1. Gambaran Umum dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Elektroforesis Gel
3. Apa itu Elektroforesis Kapiler
4. Persamaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel
5. Perbandingan Berdampingan - Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Elektroforesis Gel?
Elektroforesis gel adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan terutama asam nukleat, protein, atau asam amino berdasarkan muatan, ukuran, dan bentuknya. Teknik ini menggunakan fisik gel yang merupakan bahan polimer sebagai media pemisahannya. Gel yang paling umum digunakan adalah Agarose (untuk pemisahan asam nukleat) dan Poliakrilamida (untuk pemisahan protein). Peralatan elektroforesis gel berisi nampan pengecoran gel untuk menyiapkan gel, menuang sisir untuk menyiapkan sumur, tangki penyangga, elektroda - positif (anoda) dan negatif (katoda) dan unit suplai tegangan. Molekul seperti DNA atau RNA, yang bermuatan negatif, bergerak dari katoda ke anoda dan molekul yang bermuatan positif bergerak sebaliknya. Persiapan gel dilakukan sesuai kebutuhan. Jika resolusi tinggi atau pemisahan molekul diperlukan,gel konsentrasi tinggi dengan ukuran pori yang lebih kecil harus disiapkan. Molekul yang dipisahkan pada matriks gel diamati setelah teknik pewarnaan. Molekul yang terpisah muncul sebagai pita pada matriks gel.
Gambar 01: Elektroforesis Gel
Elektroforesis gel digunakan dalam diagnostik molekuler seperti sidik jari DNA untuk menentukan keberadaan fragmen DNA / RNA tertentu atau protein. Elektroforesis gel juga menentukan kemurnian sampel biomolekul yang diekstraksi. Elektroforesis gel dilakukan sebagai langkah awal untuk in dan hibridisasi dan sebagai analisis konfirmasi setelah pengurutan.
Apa itu Elektroforesis Kapiler?
Elektroforesis kapiler adalah modifikasi elektroforesis gel yang menggunakan prinsip pemisahan yang sama berdasarkan muatan, ukuran molekul, tetapi dilakukan dalam tabung kapiler dengan bahan gel atau polimer cair. Kapiler dibuat dari fusi silika, dan setiap tabung kapiler memiliki diameter internal 50-100μm dan panjangnya 25-100cm. Sampel disuntikkan ke dalam tabung kapiler yang berisi bahan polimer dan dipisahkan jauh lebih cepat daripada elektroforesis gel konvensional. Sistem kapiler terlindung dengan baik di dalam selubung isolator yang melindungi sampel dari kontaminasi. Kapiler dapat diisi dengan polimer cair seperti hidroksietil selulosa atau gel resolusi tinggi seperti poliakrilamida. Elektroforesis kapiler memberikan resolusi yang lebih besar; karenanya pemisahan lebih akurat. Elektroforesis kapiler menggunakan sistem detektor otomatis melalui analisis spektrofotometri. Hal ini disebabkan rasio luas permukaan terhadap volume yang lebih tinggi.
Gambar 02: Elektroforesis Kapiler
Elektroforesis kapiler digunakan dalam situasi seperti dalam forensik di mana akurasi yang lebih tinggi diperlukan dan tidak umum digunakan karena teknik ini mahal.
Apa Persamaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel?
- Pemisahan molekul pada kedua teknik tersebut didasarkan pada muatan dan ukuran molekul.
- Kedua teknik tersebut dapat digunakan untuk memisahkan asam nukleat dan protein.
- Volume sampel dari kedua teknik tersebut sama.
- Kedua teknik tersebut menggunakan penyangga untuk memfasilitasi pemisahan.
Apa Perbedaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel?
Artikel Diff Tengah sebelum Tabel
Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel |
|
| Elektroforesis kapiler merupakan teknik pemisahan biomolekul pada tabung kapiler dengan menggunakan media polimer cair atau gel. | Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan biomolekul pada bidang vertikal atau horizontal dengan menggunakan media gel polimer. |
| Pemisahan | |
| Dalam elektroforesis kapiler, pemisahan dilakukan di dalam tabung kapiler. | Pada elektroforesis gel, pemisahan dilakukan pada bidang vertikal atau horizontal. |
| Media Pemisahan | |
| Polimer cair seperti hidroksietilselulosa digunakan dalam elektroforesis kapiler. | Gel, baik agarosa atau poliakrilamida, digunakan sebagai media elektroforesis gel. |
| Keterkaitan Silang | |
| Resolusi tinggi dapat diperoleh dari elektroforesis kapiler. | Resolusi rendah pada elektroforesis gel. |
| Rasio Luas Permukaan ke Volume | |
| Rasio permukaan terhadap volume tinggi pada elektroforesis kapiler. | Rasio permukaan terhadap volume rendah dalam elektroforesis gel. |
| Teknik Deteksi | |
| Deteksi dilakukan melalui detektor otomatis spektrofotometri dalam elektroforesis kapiler. | Pewarnaan dan pengamatan melalui UV transilluminator dilakukan sebagai teknik deteksi dalam elektroforesis gel. |
Ringkasan - Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel
Diagnostik molekuler memainkan peran utama dalam dunia ilmiah. Identifikasi dan pemurnian DNA, RNA, dan Protein merupakan langkah penting dalam prosedur diagnostik. Elektroforesis adalah teknik yang memisahkan dan mengidentifikasi biomolekul dalam elektroforesis gel dan elektroforesis gel kapiler yang lebih maju. Elektroforesis gel dilakukan dalam bidang vertikal atau horizontal menggunakan gel polimer dengan ukuran pori standar sedangkan elektroforesis kapiler dilakukan dalam tabung kapiler dengan cairan polimer atau gel. Inilah perbedaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel. Setelah menyelesaikan teknik elektroforesis, biomolekul diproses lebih lanjut untuk mendapatkan informasi tingkat yang lebih tinggi melalui hibridisasi atau melalui teknik seperti sidik jari.
Unduh Versi PDF Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silahkan download versi PDF disini Perbedaan Antara Elektroforesis Gel dan Elektroforesis Kapiler.
